UPLC超高壓裝柱機(jī)的核心在于其采用高性能雙泵頭組成的超高壓泵系統(tǒng)，能夠達(dá)到18000psi。通過雙活塞調(diào)節(jié)排量并結(jié)合恒壓控制技術(shù)，實現(xiàn)梯度壓力調(diào)整和流量范圍廣(0-12ml/min)的穩(wěn)定輸出。該系統(tǒng)集成了電腦軟件反控功能，可多節(jié)點設(shè)置壓力參數(shù)，實時反饋至控制系統(tǒng)自動調(diào)節(jié)溶劑流量，確保填充過程中系統(tǒng)壓力恒定。這種精密的壓力動態(tài)平衡機(jī)制為均勻裝填提供了基礎(chǔ)保障。
區(qū)別于傳統(tǒng)色譜柱需要復(fù)雜的連接管路與接頭，現(xiàn)代UPLC超高壓裝柱機(jī)采用無管路接頭方案。例如，通過直連結(jié)構(gòu)直接對接色譜柱及相關(guān)設(shè)備，消除了中間連接部件導(dǎo)致的死體積和泄漏風(fēng)險，同時簡化了安裝流程。配合手緊式機(jī)械密封裝置，操作人員手動旋轉(zhuǎn)即可完成緊密固定，既避免了工具誤操作帶來的密封不良問題，又提升了系統(tǒng)的可靠性。
在高壓作用下，帶有微粒填料的勻漿液被高效注入色譜柱內(nèi)腔。通過準(zhǔn)確控制的線性流速和持續(xù)的壓力波動補(bǔ)償技術(shù)，確保微小顆粒在整個柱床內(nèi)實現(xiàn)高度均勻的堆積密度。這一過程有效減少了傳統(tǒng)裝填方法可能產(chǎn)生的溝流或空隙率差異，從而優(yōu)化分離效果。
UPLC超高壓裝柱機(jī)的測定步驟：
1.準(zhǔn)備工作
-流動相處理：確保所使用的流動相經(jīng)過過濾和脫氣處理，以去除其中的顆粒雜質(zhì)和溶解氣體。這一步非常重要，因為任何微小的顆粒或氣泡都可能影響柱效和后續(xù)的檢測結(jié)果。
-樣品預(yù)處理：對需要分析的樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，如過濾、離心等操作，以去除大分子雜質(zhì)、顆粒物和不溶性物質(zhì)。對于復(fù)雜樣品，還可以采用固相萃取等方法進(jìn)一步凈化，以防止這些雜質(zhì)進(jìn)入保護(hù)柱造成堵塞或污染。
2.安裝與連接
-保護(hù)柱與色譜柱連接：在擰緊過程中，要控制好力度，避免過度用力導(dǎo)致柱芯或卡套損壞，從而影響保護(hù)柱的性能。
-系統(tǒng)檢查：在開始之前，仔細(xì)檢查整個系統(tǒng)的密封性和連接是否牢固，特別是高壓環(huán)境下的各個接口處，確保無泄漏現(xiàn)象。
3.參數(shù)設(shè)置與啟動
-壓力調(diào)節(jié)：根據(jù)實驗需求設(shè)定合適的壓力范圍。UPLC系統(tǒng)的工作壓力通常超過15,000 psi，可達(dá)18000psi，通過雙活塞調(diào)節(jié)排量并實現(xiàn)恒壓控制梯度壓力。
-流量調(diào)整：設(shè)置所需的流量范圍(一般為0-12ml/min)，以保證均勻且穩(wěn)定的填料填充過程。
4.裝柱過程監(jiān)控
-實時監(jiān)測：在整個裝柱過程中，密切監(jiān)控系統(tǒng)的壓力變化。如果發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)壓力異常升高，可能是由于保護(hù)柱或色譜柱存在堵塞問題，應(yīng)立即停止分析并排查原因，避免過高的壓力對設(shè)備造成損壞。
